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科技日報訊 （黃博純）中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院研究員、吉林大學(xué)教授賴良學(xué)博士的研究團(tuán)隊利用最新的CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)成功地培育出兩種基因敲除克隆小型豬，即酪氨酸酶基因敲除豬和PARK2和PINK1雙基因敲除豬，建立了人類白化病和帕金森綜合征兩種豬模型。
課題組楊化強博士、博士研究生周小青和信吉閣，針對豬的酪氨酸酶、PARK2和PINK1基因的外顯子設(shè)計了Cas9打靶質(zhì)粒，將其分別轉(zhuǎn)染版納小型豬的胎兒成纖維細(xì)胞和巴馬小型豬的胎兒成纖維細(xì)胞后，獲得了純合的酪氨酸酶基因敲除以及PARK2和PINK1雙基因敲除的細(xì)胞系。細(xì)胞系用于體細(xì)胞核移植后獲得15頭酪氨酸酶基因敲除克隆豬，20頭PARK2和PINK1雙基因敲除克隆豬。酪氨酸酶基因敲除后，本來是黑色的版納小型豬，變成了白豬，表現(xiàn)出典型的白化病特征；而缺失PARK2和PINK1雙基因的敲除克隆豬可以作為帕金森癥大動物模型，用于研究其發(fā)生機制和評估相關(guān)治療藥物的有效性和安全性。此次賴良學(xué)研究團(tuán)隊將新興的CRISPR/Cas9技術(shù)與體細(xì)胞克隆相結(jié)合，不僅使豬基因打靶效率更高、更為精確，而且在一個世代內(nèi)首次實現(xiàn)了大動物雙基因的等位敲除。該技術(shù)路線的建立將大大加速多基因修飾豬制備，對農(nóng)業(yè)而言，可促進(jìn)豬的生產(chǎn)性能的改良；與此同時，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，也可加速大動物疾病模型的建立和異種器官移植研究進(jìn)展。
(來源:科技日報)
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